현미경 조명 방법

일반적인 조명 방법

표본을 밝히는 방법은 현미경 관찰에서 중요한 역할을 합니다. 조명 방법은 크게 투과 조명과 입사 조명으로 분류됩니다. 시료 및 목적에 따라서 적절한 방법을 선택해야 합니다.

투과 조명

표본의 배면을 조사합니다. 이 방법은 무색투명한 세포처럼 생물학적 관찰에 적합하며 일반적인 생물 현미경에 적용됩니다. 투과 조명에는 명시야 조명과 암시야 조명이 있습니다.

- 명시야 조명
배면에 조명을 비추어 투명하게 만들어서 표본을 관찰하는 일반적인 방법. 배경보다 어두운 부분이 밝은 배경에 영사됩니다.
- 암시야 조명
명시야 조명과 마찬가지로 배면을 조사하지만, 직사광의 간섭을 이용하여 표본의 윤곽이 어두운 배경에서 빛나게 만듭니다. 이 방법은 저대비 세포 관찰에 적합하며 암시야 집광 렌즈가 필요합니다.

입사 조명

표본의 전면을 조사합니다. 이 방법은 물질 및 기타 산업용 표본과 같은 3D 물체와 불투명 표본을 관찰할 때 유용합니다. 이러한 조명 유형은 일반적으로 실체 현미경에 적용됩니다.

투과 조명의 종류

집광 렌즈가 탑재된 광학 현미경에서 이용할 수 있는 투과 조명에는 쾰러 조명, 확산 조명, 임계 조명의 세 가지 유형이 있습니다.

쾰러 조명

대물렌즈 후방으로 빛을 모읍니다. 이는 가장 일반적으로 사용되는 투과 조명 방법이며, 밝고 다양하지 않은 조명이 특징입니다. 이 방법은 고배율 관찰에 없어서는 안 될 방법입니다.

확산 조명

반사판에 놓인 빛 확산판이 균일한 조명을 만들어내지만, 확산판을 통과하면서 빛의 밝기가 약간 약해집니다.

임계 조명

표본의 표면에서 빛을 모읍니다. 이 방법은 밝은 조명을 만들어내지만, 빛이 불균일하게 분포할 가능성이 큽니다.

광원의 차이

이용하는 현미경에 따라서 광원이 달라질 수 있습니다. 각 광원의 특성에 대한 이해를 바탕으로 적절한 광원을 선택해야 합니다.

광학 현미경

- 자연광(외란광)
외부에서 나오는 빛을 반사 미러로 보내서 표본을 밝힙니다. 직사 일광은 반드시 피해야 합니다. 형광등과 같은 인공 광원을 자연광 대신 이용할 수도 있습니다.
- 텅스텐등
저렴하고 쉽게 구할 수 있는 텅스텐등은 백열등이라고도 불리며, 광학 현미경에서 널리 이용됩니다.
- 할로겐등
할로겐등은 텅스텐등에 비해 값이 비싸고 예상수명이 더 길며, 흰색에 가까운 균일한 밝기의 빛이 특징입니다.

형광 현미경

- 수은등
고압 수은등이라고도 알려진 수은등은 형광 물질별 파장을 여자하는 형광 관찰에서 광원으로 이용됩니다. 자외선에서 근적외선에 이르는 광범위한 파장 범위에서 강력한 전력을 제공할 수 있으며, 필터를 활용해 요구되는 파장의 빛을 전달할 수 있습니다. 다양한 파장에 따라 다양한 필터를 이용할 수 있으며, 형광 염료를 적절히 조합하여 사용함으로써 특정한 형광을 선별적으로 감지할 수 있습니다. 메탈핼라이드램프는 또 다른 유형의 수은등으로, 고전압 전력 공급 장치가 있어야 작동할 수 있습니다.
- 제논등
제논등은 일반적으로 카메라에서 섬광전구로 이용되며, 높은 밝기가 특징입니다.
- LED 램프
LED는 상대적으로 좁은 파장대의 빛을 방출하므로 LED와 형광물질을 조합하거나 여러 LED를 조합하여 백색광을 얻을 수 있습니다. 작은 크기와 낮은 전력소비량, 긴 수명이 특징이지만, LED 조합 방식에 따라서는 특정한 파장에서 광력이 낮을 수도 있습니다.

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